1986年導演謝鐵驪啟動電影《紅樓夢》，共六部八集的電影拍攝歷時3年，招入了越劇、京劇、呂劇等不同劇種的演員，何賽飛便是其中之一。片中她飾演妙玉，這是她走上銀幕的開始。

　　1994年何賽飛拍攝了李少紅執導的電影《紅粉》和陳凱歌執導的電影《風月》。在《紅粉》中，她飾演青樓女子小萼，演得不溫不火、恰當好處， ?這部影片也進一步提高了她的知名度。 ?

　　1995年她獲得中國電影表演藝術學會獎。1996年她憑借在《敵后武工隊》中的表演獲得第19屆大眾電影百花獎最佳女配角獎；同年接拍了電視劇《情系國脈》、《漢口往事》、《昨日留言》。 ?

　　2000年，她接拍了20集電視劇《愛是陽光》，并在劇中任女主角。 ?2001年，在郭寶昌導演的電視劇《大宅門》中飾演名妓楊九紅，憑借在這部電視劇中的表現，何賽飛獲得中央電視臺美菱杯“觀眾最喜愛的十佳女演員獎”。 ?

　　2004年出演電視劇《月影風荷》，飾演季文月一角 ?。2005年加盟上海滑稽劇團。

　　2007年12月，何賽飛到寧波出演滑稽戲《太太萬歲》；同年主演電視劇《江湖兄弟》，劇中何賽飛與施羽出演一對在江湖中飄泊的戀人 ?。

　　2008年與湯唯、梁朝偉合作出演李安導演的電影《色戒》；飾演蕭太太一角。2010年主演電視劇《老馬家的幸福往事》 ?。

　　2011年，主演電視劇《后宮》，劇中何賽飛飾演的明憲宗的生母周太后。 ?2012年出演電視劇《唐宮燕》，飾演唐中宗李顯的妻子韋皇后 ?。

　　2013年與佟麗婭 、楊爍合作出演電視劇《刀客家族的女人》 ?；4月，何賽飛主演的電視劇《那金花和她的女婿》在全國各大衛視黃金檔播出。 ?2015年，加盟主演抗戰片《那些女人》，飾演水芹媽 ?。